在现代生物学和医学研究中，荧光显微成像技术扮演着至关重要的角色。荧光现象涉及分子在光的激发下，电子从基态跃迁至激发态，并在返回到基态时释放出能量，产生辐射光。荧光光谱主要包括两种类型：激发谱和发射谱。激发谱反映了在不同波长的激发光作用下，某一特定波长处的荧光强度变化，即激发光的相对效率；而发射谱则展示了在固定波长的激发光作用下，荧光强度在不同波长上的分布，揭示了不同波长光成分的相对强度。
当分子受到光激发时，电子可能被提升至第一激发态的高振动能级或第二激发态。随后，电子会通过内转换或驰豫振荡过程，达到第一激发态的低振动能级。由于激发态的不稳定性，电子最终会返回至基态，并在此过程中发射出荧光。
倒置荧光显微镜的构成及特点
1.采用落射式照明方式，即光源通过物镜投射于样品上；
2.使用波长较短的紫外光源，提高分辨率；
3.配备特殊的滤光片，用于保护人眼和提高成像质量。
徕卡荧光显微镜是一种高级显微镜，具备以下功能：
1.荧光成像：通过荧光光源和滤光片系统，观察和拍摄荧光标记的样本，实现对细胞和组织内特定分子的可视化研究；
2.高分辨率成像：采用先进的光学设计和高性能目镜、物镜，实现高分辨率成像，揭示细胞结构和细胞器的细微特征；
3.实时成像：配备快速相机和图像处理系统，进行实时成像和录像，记录细胞和组织的动态过程；
4.多通道成像：使用多个荧光染料进行成像，观察和记录不同分子的分布和相互作用；
5.三维成像：配备Z轴扫描系统，获取连续的光学切片并重建三维图像，深入分析细胞和组织的立体结构和空间关系；
6.自动化和高通量成像：部分显微镜配备自动化系统，实现自动对焦、图像捕获和分析等功能，支持大规模、高通量的实验和筛选。
倒置荧光显微镜使用中的注意事项
1.在使用倒置荧光显微镜时，应注意以下事项：
2.严格按照显微镜出厂说明书要求进行操作，避免随意更改程序；
3.在暗室中进行检查，确保光源稳定后再开始观察标本；
4.戴上防护眼镜，防止紫外线对眼睛的损害；
5.控制检查时间，避免超过90分钟，以保持荧光强度和光源寿命；
6.集中检查标本，节省时间和保护光源；
7.标本染色后立即观察，避免荧光减弱；
8.使用无荧光油，避免直视紫外光源；
9.安装稳压器，确保电源稳定，延长荧光灯寿命。
