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浅述倒置生物显微镜的用途与记录方法

发布时间:2020-06-16   点击次数:31次
  倒置生物显微镜除了具体传统显微镜的明场观察功能外,比如观察培养皿里的贴壁细胞或悬浮细胞,更主要的用途是作为免疫荧光观察的工具;利用相应的荧光染料对抗体进行标记,通过倒置生物显微镜观察,就可以判断抗体是否与病毒细胞进行结合,在细胞核中发现抗体荧光特征,就证明了病毒的存在,这是免疫荧光的直接法观察。
  此外还有间接法免疫荧光观察方法,该方法对操作人员的经验要求比较高。在病毒实验中,斑点荧光检测法应用也是非常广泛的,该方法是对二抗进行相应的荧光染料标记,然后再利用倒置生物显微镜进行检测,如果存在被病毒感染的细胞,就能形成对应的荧光斑点。
 

  倒置生物显微镜观察到的荧光图像具有形态特征,具有荧光颜色和亮度。在判断结果时,必须结合起来作出的判断。结果是根据主观指标,即工人的眼睛来记录的。作为一般的定性观测,它基本上是的。随着科技的发展,客观指标被用来记录判断结果,如使用细胞分光光度计、图像分析仪等仪器。但是,这些文书所记录的结果也必须与主观判断相结合。
  倒置生物显微镜摄影对于记录荧光图像是非常必要的。由于荧光容易褪色和减弱,因此有必要对实时照相的结果进行记录。该方法与普通显微摄影方法基本相同。只需使用高速光敏膜,如ASA200或以上或24。由于紫外光对荧光的猝灭效应很大,如荧光标记物FITC等,在紫外光照射30s时,荧光亮度下降了50%,因此曝光速度太慢,无法捕捉到荧光图像。一般研究倒置生物显微镜有半自动或全自动显微摄影系统。
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