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提升徕卡生物显微镜测量结果准确性的一系列方法

发布时间:2020-10-24   点击次数:50次
  定期对徕卡生物显微镜进行校准,有利于提升测量结果的准确性,因此每一个使用者都应学会如何校准显微镜,今天小编简单为大家做个介绍。
1、校准项目:1)外观检查。
  2)微调手轮刻线间隔量:带有刻度的微调手轮,其平均刻线间隔量应为1μm或其整数倍。
  3)生物显微镜物镜放大倍数误差:生物显微镜物镜放大率误差不超过±5%。
  4)双目显微镜左右两系统放大倍数差:双目显微镜的左右两系统放大倍数差不超过2%。
  5)双目显微镜左右视场中心偏差。
  6)目镜标尺的刻线间隔误差:目镜标尺的刻线间隔误差不超过±0.01mm。
  2、校准环境:环境温度:(20±10)℃;相对湿度:45%~85%。
  3、校准方法:1)外观方面:显微镜应标有名称、型号、编号、制造厂等信息。光学系统在整个视场内成像应清晰,视场内不应有影响观察的阴影或反射光斑等,成像的清晰区域应与视场同心。显微镜各部分运动应灵活平稳,无卡滞和跳动现象,视场内照明均匀。双目显微镜左右两系统的光谱色应基本一致,无明显的明暗差异。
  2)微调手轮刻线间隔量:微调手轮应灵活平稳,松紧适中。微调手轮刻线间隔量应测量手轮的起始、中间、末端三个位置。测量前,将指示表用专用夹具固定在生物显微镜上,保证指示表与显微镜紧固、牢靠,固定指示表时应保证测量头与载物台垂直接触。调节生物显微镜调焦手轮将指示表读数置零。旋转调焦手轮10个刻度,读取示值,以指示值的1/10作为测量结果。将在起始、中间、末端三个位置上的测量平均值作为校准结果。
  3)物镜放大倍数误差:调节光源至适度位置,将带刻度分划尺的目镜安装在生物显微镜其中一个套筒上,将标准玻璃刻度尺置于载物台上,调节目镜与标准玻璃尺使分划尺刻线与标准玻璃尺刻线平行,避免出现测量误差。调节载物台使玻璃尺零位与分划尺一端对齐,然后直接读数。
  β物=L'/L 式中:L——标准玻璃刻度尺间距,mm;L'——目镜分划板上读取的相应标准玻璃刻度尺像的问距,mm;物镜放大倍数误差以实测放大倍数与名义放大倍数之差的相对误差确定,具体计算公式如下:Δβ=(β物-β理论)/β物×1**%  式中:Δβ——物镜放大倍数误差;β物——物镜放大倍数实测值;β理论——物镜放大倍数名义值。
  4)双目显微镜左右两系统放大倍数差:依据生物显微镜物镜放大倍数误差的操作步骤,用带刻度分划尺的目镜替换对显微镜左右两个目镜并分别进行测量,得到两观察系统放大倍数,其差值即为校准结果。
  5)双目显微镜左右视场中心偏差:将十字分划板置于载物台上,将带刻度分划尺的目镜安装在生物显微镜左筒,调节十字分划板与目镜,使十字分划与目镜内的十字中心完全重合,然后将目镜从左筒放人右筒读出其与分划板中心偏离值即为测量值。
  6)目镜标尺的刻线间隔误差:在对生物显微镜物镜放大倍数误差进行校准后,该项目可以不进行计量校准。具体校准方法为在载物台上放置分度值为0.01mm的标准玻璃刻度尺,安装10倍显微目镜,调焦至目镜视场清晰。调节显微目镜与标准玻璃刻度尺使二者端线对齐,并保证二者线纹刻度方向平行。
  此时在目镜视场中直接读取二者之差△L,即为目镜标尺相应刻线的间隔误差。若显微镜目镜带有十字刻线,校准方法与上述方法相同,测量结果应取两方向Zda值为间隔误差。目镜标尺的刻线间隔误差的测量需在目镜标尺全长范围内均匀分布的5点进行。
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